GMO فصل نکالنے اور بڑھانے کی کٹ۔

خاص طور پر GMO فصل نکالنے اور ٹرانسجینک پی سی آر کا پتہ لگانے کے لیے موزوں ہے۔

GMO فصل نکالنے اور بڑھانے کی کٹ خاص طور پر GMO فصلوں کے PCR پتہ لگانے کے لیے تیار کی گئی ہے۔ کٹ کے پارٹ اے میں موجود منفرد لیسس بفر خاص طور پر اہم فصلوں یعنی گندم ، مکئی ، چاول ، کپاس اور سویابین کے ٹشوز کو لائس کر سکتا ہے تاکہ متعلقہ اجزاء جیسے نیوکلک ایسڈ اور پروٹین کو خارج کر سکے۔ مخصوص RNase کے ساتھ مل کر فینول/کلوروفارم نکالنا اعلی پاکیزگی والے جینومک ڈی این اے کو پاک کر سکتا ہے جس میں RNA ، پروٹین اور دھاتی آئنوں جیسی نجاست نہیں ہے۔ پی سی آر کا پتہ لگانے کے بعد پاک شدہ ڈی این اے کا استعمال کیا جا سکتا ہے۔ کٹ کا حصہ بی دو اجزاء کا سادہ پی سی آر رد عمل کا نظام ہے جس میں 2 × GMO PCR بفر اور GMO DNA پولیمریز شامل ہیں۔ جی ایم او ڈی این اے پولیمریز ایک تھرماسٹیبل پولیمریز ہے جو اینٹی باڈیز کے ساتھ ترمیم شدہ ہے۔ 2 × GMO PCR بفر میں مختلف اجزاء جیسے MgCl شامل ہیں۔₂، ڈی این ٹی پی ، پی سی آر ری ایکشن سٹیبلائزر ، آپٹیمائزر اور بڑھانے والا 2 × GMO کے حراستی میں۔ اس میں تیز رفتار اور سادہ آپریشن ، اعلی حساسیت ، مضبوط خصوصیت ، اچھی استحکام وغیرہ کے فوائد ہیں ، یہ GMO فصل ٹرانسجینک پی سی آر کی کھوج کے لیے پارٹ اے کے ساتھ مل کر استعمال کیا جا سکتا ہے۔

کیٹ. نہیں	پیکنگ سائز
4992905	200 rxn

ہمیں ای میل بھیجیں۔

مصنوعات کی تفصیل

تجرباتی مثال۔

عمومی سوالات

پروڈکٹ ٹیگز۔

خصوصیات

applic وسیع اطلاق: یہ کٹ پانچ بڑی GMO فصلوں سے اعلی معیار کا جینومک ڈی این اے نکال سکتی ہے۔
■ سادہ اور تیز: GMO فصل جینومک ڈی این اے نکالنا 2 گھنٹے کے اندر مکمل کیا جا سکتا ہے۔ بڑے ریفریجریٹڈ سینٹری فیوجز ، آلات اور آلات کی کم ضروریات کی ضرورت نہیں۔ تحقیقی اداروں کی ہر سطح پر GMO فصلوں کے تیزی سے جینومک ڈی این اے نکالنے کے لیے موزوں ہے۔
efficiency اعلی کارکردگی اور خصوصیت: اینٹی باڈی میں ترمیم شدہ طاق پولیمریز کا منفرد بفر موثر پولیمریز امپلیفیکیشن کو یقینی بناتا ہے ، جو کہ عام طاق پولیمریز سے زیادہ مخصوص ہے۔

درخواستیں۔

کٹ گندم ، مکئی ، چاول ، کپاس اور سویابین جیسی بڑی GMO فصلوں سے اعلی معیار کا جینومک ڈی این اے نکال سکتی ہے اور GMO فصلوں پر ٹرانسجینک پی سی آر کا پتہ لگاسکتی ہے۔

تمام مصنوعات ODM/OEM کے لیے اپنی مرضی کے مطابق کی جا سکتی ہیں۔ تفصیلات کے لیے ،اپنی مرضی کے مطابق سروس (ODM/OEM) پر کلک کریں

پچھلا: فاسٹ کنگ ون سٹیپ RT-qPCR کٹ (پروب)

اگلے: TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit۔

جینومک ڈی این اے نکالنا۔
جینومک ڈی این اے نکالنا بالترتیب چاول ، مکئی ، سویابین ، کپاس اور گندم کے 100 ملی گرام پتے پر کیا گیا۔ تجربہ دو بار دہرایا گیا۔ کل 100 μl eluents میں سے 3 μl DNA فی لین لوڈ کیا گیا تھا۔
ایگروز جیل کی حراستی 2 تھی۔ الیکٹروفورسس 6 V/cm کے تحت 20 منٹ کے لیے کیا گیا۔
D15000: TIANGEN D15000 DNA مارکر۔

پی سی آر کا پتہ لگانا
چاول ، مکئی ، سویابین ، کپاس اور گندم کے جینومک ڈی این اے کو بالترتیب بڑھایا گیا۔ تجربہ دو بار دہرایا گیا۔ کل 20 μl رد عمل کے نظام سے 6 μl فی لین لوڈ کیا گیا تھا۔
ایگروز جیل کی حراستی 2 تھی۔ الیکٹروفورسس 6 V/cm کے تحت 20 منٹ کے لیے کیا گیا۔
D15000: TIANGEN D15000 DNA مارکر۔

س: کوئی پرورش بینڈ نہیں۔

A-1 سانچہ۔

■ ٹیمپلیٹ میں پروٹین کی نجاست یا طاق روکنے والے وغیرہ شامل ہیں DNA ڈی این اے ٹیمپلیٹ کو صاف کریں ، پروٹین کی نجاست کو ہٹا دیں یا پییفوریشن کٹس کے ساتھ ٹیمپلیٹ ڈی این اے نکالیں۔

template ٹیمپلیٹ کی ڈینیٹریشن مکمل نہیں ہے den مناسب طریقے سے ڈینیٹریشن کے درجہ حرارت میں اضافہ کریں اور ڈینیٹریشن کا وقت طویل کریں۔

■ سانچہ تنزلی —— سانچے کو دوبارہ تیار کریں۔

A-2 پرائمر۔

pri پرائمر کا ناقص معیار e پرائمر کو دوبارہ ترکیب کریں۔

پرائمر ہراس متعدد منجمد اور پگھلنے سے بچیں یا طویل مدتی 4 ° C کرائیو محفوظ ہیں۔

pri پرائمر کا نامناسب ڈیزائن (مثال کے طور پر پرائمر کی لمبائی کافی نہیں ، ڈائمر پرائمر وغیرہ کے درمیان بنتا ہے) -دوبارہ ڈیزائن پرائمر (پرائمر ڈائمر اور سیکنڈری ڈھانچے کی تشکیل سے بچیں)

A-3 Mg^2+۔توجہ مرکوز کرنا

■ ملی گرام^2+۔ حراستی بہت کم ہے - خاص طور پر Mg میں اضافہ۔^2+۔حراستی: ایم جی کو بہتر بنائیں۔^2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی^2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔

A-4 اینیلنگ درجہ حرارت۔

an اعلی اینیلنگ درجہ حرارت پرائمر اور ٹیمپلیٹ کے بائنڈنگ کو متاثر کرتا ہے۔ اینیلنگ درجہ حرارت کو کم کریں اور 2 ° C کے میلان کے ساتھ حالت کو بہتر بنائیں۔

A-5 توسیع کا وقت۔

extension مختصر توسیع کا وقت extension توسیع کے وقت میں اضافہ کریں۔

س: غلط مثبت۔

فینومینا: منفی نمونے ٹارگٹ سیونس بینڈ بھی دکھاتے ہیں۔

پی سی آر کی A-1 آلودگی۔

target ٹارگٹ تسلسل یا بڑھاوے کی مصنوعات کی کراس آلودگی fully احتیاط سے منفی نمونے میں ہدف کی ترتیب پر مشتمل نمونے کو پائپ نہ کریں یا انہیں سینٹرفیج ٹیوب سے باہر نہ پھینکیں۔ موجودہ نیوکلک ایسڈ کو ختم کرنے کے لیے ریجنٹس یا آلات کو آٹوکلیو کیا جانا چاہیے ، اور آلودگی کے وجود کا تعین منفی کنٹرول تجربات کے ذریعے کیا جانا چاہیے۔

ag ریجینٹ آلودگی li ریجنٹس کو ایکوئٹ کریں اور کم درجہ حرارت پر اسٹور کریں۔

A-2 اعظم۔r

■ ملی گرام^2+۔ حراستی بہت کم ہے - خاص طور پر Mg میں اضافہ۔^2+۔ حراستی: ایم جی کو بہتر بنائیں۔^2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی^2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔

■ نامناسب پرائمر ڈیزائن ، اور ہدف کی ترتیب میں غیر ہدف ترتیب کے ساتھ ہم آہنگی ہے۔ پرائمر دوبارہ ڈیزائن کریں۔

س: غیر مخصوص پرورش۔

فینومینا: پی سی آر پرورش بینڈ متوقع سائز سے متضاد ہیں ، بڑے یا چھوٹے ، یا بعض اوقات دونوں مخصوص امپلیفیکیشن بینڈ اور غیر مخصوص پرورش بینڈ ہوتے ہیں۔

A-1 پرائمر۔

pri غریب پرائمر کی خصوصیت

e دوبارہ ڈیزائن پرائمر۔

mer پرائمر حراستی بہت زیادہ ہے ro مناسب طریقے سے ڈینیٹریشن کے درجہ حرارت میں اضافہ کریں اور ڈینیٹریشن کا وقت طویل کریں۔

A-2 Mg^2+۔ توجہ مرکوز کرنا

Mg ایم جی^2+۔ حراستی بہت زیادہ ہے - Mg2+ حراستی کو خاص طور پر کم کریں: Mg کو بہتر بنائیں۔^2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی^2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔

A-3 تھرماسٹیبل پولیمریز۔

en ضرورت سے زیادہ انزائم کی مقدار 0.5 0.5 U کے وقفوں سے مناسب طریقے سے انزائم کی مقدار کم کریں۔

A-4 اینیلنگ درجہ حرارت۔

ne اینیلنگ درجہ حرارت بہت کم ہے rop مناسب طریقے سے اینیلنگ درجہ حرارت میں اضافہ کریں یا دو مرحلے اینیلنگ کا طریقہ اختیار کریں

A-5 PCR سائیکل

PC بہت زیادہ پی سی آر سائیکل PC پی سی آر سائیکلوں کی تعداد کم کریں۔

س: پیچ یا سمیر بینڈ۔

A-1 پرائمر۔specific غریب خصوصیت the پرائمر کو دوبارہ ڈیزائن کریں ، پرائمر کی پوزیشن اور لمبائی کو تبدیل کریں تاکہ اس کی خاصیت میں اضافہ ہو۔ یا نیسٹڈ پی سی آر انجام دیں۔

A-2 سانچہ DNA۔

template ٹیمپلیٹ خالص نہیں ہے the ٹیمپلیٹ کو صاف کریں یا ڈی این اے کو پیوریفیکیشن کٹس سے نکالیں۔

A-3 Mg^2+۔ توجہ مرکوز کرنا

ایم جی^2+۔ حراستی بہت زیادہ ہے - Mg کو خاص طور پر کم کریں۔^2+۔ حراستی: ایم جی کو بہتر بنائیں۔^2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی^2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔

A-4 dNTP۔

- ڈی این ٹی پی کی حراستی بہت زیادہ ہے - ڈی این ٹی پی کی حراستی کو مناسب طریقے سے کم کریں۔

A-5 اینیلنگ درجہ حرارت۔

low بہت کم اینیلنگ درجہ حرارت rop مناسب طریقے سے اینیلنگ درجہ حرارت میں اضافہ کریں۔

A-6 سائیکل

many بہت زیادہ سائیکل cycle سائیکل نمبر کو بہتر بنائیں۔

سوال: 50 μl PCR رد عمل کے نظام میں کتنا سانچہ DNA شامل کیا جانا چاہیے؟

سوال: لمبے ٹکڑوں کو کیسے بڑھایا جائے؟

پہلا قدم مناسب پولیمریز کا انتخاب کرنا ہے۔ 3'-5 'exonuclease سرگرمی کی کمی کی وجہ سے باقاعدہ Taq پولیمریز پروف ریڈنگ نہیں کر سکتا ، اور مماثلت ٹکڑوں کی توسیع کی کارکردگی کو بہت کم کر دے گی۔ لہذا ، باقاعدہ تق پولیمریز 5 kb سے بڑے ہدف کے ٹکڑوں کو مؤثر طریقے سے بڑھا نہیں سکتا۔ توق پولیمریز کو خصوصی ترمیم یا دیگر اعلی فڈیلٹی پولیمریز کے ساتھ منتخب کیا جانا چاہیے تاکہ توسیع کی کارکردگی کو بہتر بنایا جاسکے اور لمبے ٹکڑے کو بڑھانے کی ضروریات کو پورا کیا جاسکے۔ مزید برآں ، لمبے ٹکڑوں کو بڑھانے کے لیے پرائمر ڈیزائن ، ڈینیٹریشن ٹائم ، ایکسٹینشن ٹائم ، بفر پی ایچ وغیرہ کے متعلقہ ایڈجسٹمنٹ کی بھی ضرورت ہوتی ہے۔ ٹیمپلیٹ کو پہنچنے والے نقصان کو روکنے کے لیے ، 94 ° C پر ڈینیٹریشن کا وقت 30 سیکنڈ یا اس سے کم فی سائیکل ہونا چاہیے ، اور درجہ حرارت 94 ° C تک بڑھانے کا وقت 1 منٹ سے کم ہونا چاہیے۔ مزید برآں ، توسیع کا درجہ حرارت تقریبا 68 68 ° C پر رکھنا اور 1 kb/min کی شرح کے مطابق توسیع کا وقت ڈیزائن کرنا لمبے ٹکڑوں کی موثر توسیع کو یقینی بنا سکتا ہے۔

س: پی سی آر کی پرورش کی وفاداری کو کیسے بہتر بنایا جائے؟

اعلی خلوص کے ساتھ مختلف ڈی این اے پولیمریز کا استعمال کرکے پی سی آر پرورش کی غلطی کی شرح کو کم کیا جاسکتا ہے۔ اب تک پائے جانے والے تمام طاق ڈی این اے پولیمریز میں ، پی ایف یو انزائم میں سب سے کم خرابی کی شرح اور سب سے زیادہ وفاداری ہے (منسلک ٹیبل دیکھیں)۔ انزائم سلیکشن کے علاوہ ، محققین رد عمل کے حالات کو بہتر بنا کر پی سی آر اتپریورتن کی شرح کو مزید کم کرسکتے ہیں ، بشمول بفر کمپوزیشن ، تھرماسٹیبل پولیمریز کی حراستی اور پی سی آر سائیکل نمبر کو بہتر بنانا۔

اپنا پیغام یہاں لکھیں اور ہمیں بھیجیں۔

مصنوعات کے زمرے۔

ہمیں کیوں منتخب کریں۔

اس کے قیام کے بعد سے ، ہماری فیکٹری اصول کی پاسداری کے ساتھ پہلی عالمی معیار کی مصنوعات تیار کر رہی ہے۔
پہلے معیار کا ہماری مصنوعات نے انڈسٹری میں بہترین ساکھ حاصل کی ہے اور نئے اور پرانے صارفین کے درمیان قیمتی اعتماد۔

پوچھ گچھ