TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit۔
خصوصیات
سادہ اور تیز: مختلف ٹشوز سے ڈی این اے مائع نائٹروجن پیسنے کی ضرورت کے بغیر 5 منٹ میں نکالا جا سکتا ہے۔
applications وسیع ایپلیکیشنز: پودوں کے پتے ، بیج ، جانوروں کے ٹشوز ، خون کے نمونے (تازہ خون ، اینٹی کوگولیشن ، خون کے جمنے ، خشک خون کے دھبے وغیرہ) ، خمیر اور بیکٹیریا کے لیے قابل اطلاق۔
compat مضبوط مطابقت: پی سی آر ریجنٹ مختلف نمونے کے ذرائع سے نکالے گئے ڈی این اے کو بڑھانے کے لیے موزوں ہے۔
درخواستیں۔
■ جین کا پتہ لگانا: بڑے پیمانے پر جین کا پتہ لگانے کے لیے مثالی انتخاب۔
اہم نوٹ
samples اعلی درجے کے فینول پر مشتمل نمونوں کے لیے ، جیسے کپاس کے پتے ، نمونے کی ان پٹ کی مقدار سختی سے 0.4 ملی گرام سے کم ہونی چاہیے ، ورنہ پی سی آر کا رد عمل متاثر ہوگا۔
تمام مصنوعات ODM/OEM کے لیے اپنی مرضی کے مطابق کی جا سکتی ہیں۔ تفصیلات کے لیے ،اپنی مرضی کے مطابق سروس (ODM/OEM) پر کلک کریں
 |
ڈی این اے بالترتیب مکئی ، گندم ، چاول ، سویابین اور کپاس کے 5 ملی گرام پتے اور بیجوں سے نکالا گیا۔ پی سی آر نے مخصوص پرائمر کا استعمال کرتے ہوئے ڈی این اے کو بڑھایا۔ کل 20 μl eluents سے 6 μl DNA فی لین پر لادا گیا تھا۔ 1: مثبت کنٹرول جینوم؛ 2: نمونے چھوڑ دیں 3: بیج کے نمونے 4: این ٹی سی 5: D2000 پرائمر |
 |
M: TIANGEN مارکر D2000 1: مثبت کنٹرول 2-7: فلٹر پیپر پر خشک خون کے دھبوں کی تعداد بالترتیب 1-6 ہے۔ 8: منفی کنٹرول 3 ملی میٹر پنچر کو فلٹر پیپر سے خشک خون کے دھبے نکالنے کے ٹیسٹ کے لیے بطور مواد استعمال کیا گیا۔ کل 20 μl eluents سے 6 μl DNA فی لین پر لادا گیا تھا۔ |
 |
M: TIANGEN مارکر D2000 1: مثبت کنٹرول (جینومک ڈی این اے کو سانچے کے طور پر استعمال کیا گیا تھا) 2-7: شامل کردہ خون کی مقدار بالترتیب 10 μl ، 20 μl ، 30 μl ، 40 μl ، 50 μl اور 60 μl ہے۔ 8-13: شامل خون کی مقدار بالترتیب 10 μl ، 20 μl ، 30 μl ، 40 μl ، 50 μl اور 60 μl ہے۔ 14: این ٹی سی کل 20 μl eluents میں سے 6 μl DNA ایگروز جیل پر لادا گیا تھا۔ |
A-1 سانچہ۔
■ ٹیمپلیٹ میں پروٹین کی نجاست یا طاق روکنے والے وغیرہ شامل ہیں DNA ڈی این اے ٹیمپلیٹ کو صاف کریں ، پروٹین کی نجاست کو ہٹا دیں یا پییفوریشن کٹس کے ساتھ ٹیمپلیٹ ڈی این اے نکالیں۔
template ٹیمپلیٹ کی ڈینیٹریشن مکمل نہیں ہے den مناسب طریقے سے ڈینیٹریشن کے درجہ حرارت میں اضافہ کریں اور ڈینیٹریشن کا وقت طویل کریں۔
■ سانچہ تنزلی —— سانچے کو دوبارہ تیار کریں۔
A-2 پرائمر۔
pri پرائمر کا ناقص معیار e پرائمر کو دوبارہ ترکیب کریں۔
پرائمر ہراس متعدد منجمد اور پگھلنے سے بچیں یا طویل مدتی 4 ° C کرائیو محفوظ ہیں۔
pri پرائمر کا نامناسب ڈیزائن (مثال کے طور پر پرائمر کی لمبائی کافی نہیں ، ڈائمر پرائمر وغیرہ کے درمیان بنتا ہے) -دوبارہ ڈیزائن پرائمر (پرائمر ڈائمر اور سیکنڈری ڈھانچے کی تشکیل سے بچیں)
A-3 Mg2+۔توجہ مرکوز کرنا
■ ملی گرام2+۔ حراستی بہت کم ہے - خاص طور پر Mg میں اضافہ۔2+۔ حراستی: ایم جی کو بہتر بنائیں۔2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔
A-4 اینیلنگ درجہ حرارت۔
an اعلی اینیلنگ درجہ حرارت پرائمر اور ٹیمپلیٹ کے بائنڈنگ کو متاثر کرتا ہے۔ اینیلنگ درجہ حرارت کو کم کریں اور 2 ° C کے میلان کے ساتھ حالت کو بہتر بنائیں۔
A-5 توسیع کا وقت۔
extension مختصر توسیع کا وقت extension توسیع کے وقت میں اضافہ کریں۔
فینومینا: منفی نمونے ٹارگٹ سیونس بینڈ بھی دکھاتے ہیں۔
پی سی آر کی A-1 آلودگی۔
target ٹارگٹ تسلسل یا بڑھاوے کی مصنوعات کی کراس آلودگی fully احتیاط سے منفی نمونے میں ہدف کی ترتیب پر مشتمل نمونے کو پائپ نہ کریں یا انہیں سینٹرفیج ٹیوب سے باہر نہ پھینکیں۔ موجودہ نیوکلک ایسڈ کو ختم کرنے کے لیے ریجنٹس یا آلات کو آٹوکلیو کیا جانا چاہیے ، اور آلودگی کے وجود کا تعین منفی کنٹرول تجربات کے ذریعے کیا جانا چاہیے۔
ag ریجینٹ آلودگی li ریجنٹس کو ایکوئٹ کریں اور کم درجہ حرارت پر اسٹور کریں۔
A-2 اعظم۔r
■ ملی گرام2+۔ حراستی بہت کم ہے - خاص طور پر Mg میں اضافہ۔2+۔ حراستی: ایم جی کو بہتر بنائیں۔2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔
■ نامناسب پرائمر ڈیزائن ، اور ہدف کی ترتیب میں غیر ہدف ترتیب کے ساتھ ہم آہنگی ہے۔ پرائمر دوبارہ ڈیزائن کریں۔
فینومینا: پی سی آر پرورش بینڈ متوقع سائز سے متضاد ہیں ، بڑے یا چھوٹے ، یا بعض اوقات دونوں مخصوص امپلیفیکیشن بینڈ اور غیر مخصوص پرورش بینڈ ہوتے ہیں۔
A-1 پرائمر۔
pri غریب پرائمر کی خصوصیت
e دوبارہ ڈیزائن پرائمر۔
mer پرائمر حراستی بہت زیادہ ہے ro مناسب طریقے سے ڈینیٹریشن کے درجہ حرارت میں اضافہ کریں اور ڈینیٹریشن کا وقت طویل کریں۔
A-2 Mg2+۔ توجہ مرکوز کرنا
Mg ایم جی2+۔ حراستی بہت زیادہ ہے - Mg2+ حراستی کو خاص طور پر کم کریں: Mg کو بہتر بنائیں۔2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔
A-3 تھرماسٹیبل پولیمریز۔
en ضرورت سے زیادہ انزائم کی مقدار 0.5 0.5 U کے وقفوں سے مناسب طریقے سے انزائم کی مقدار کم کریں۔
A-4 اینیلنگ درجہ حرارت۔
ne اینیلنگ درجہ حرارت بہت کم ہے rop مناسب طریقے سے اینیلنگ درجہ حرارت میں اضافہ کریں یا دو مرحلے اینیلنگ کا طریقہ اختیار کریں
A-5 PCR سائیکل
PC بہت زیادہ پی سی آر سائیکل PC پی سی آر سائیکلوں کی تعداد کم کریں۔
A-1 پرائمر۔specific غریب خصوصیت the پرائمر کو دوبارہ ڈیزائن کریں ، پرائمر کی پوزیشن اور لمبائی کو تبدیل کریں تاکہ اس کی خاصیت میں اضافہ ہو۔ یا نیسٹڈ پی سی آر انجام دیں۔
A-2 سانچہ DNA۔
template ٹیمپلیٹ خالص نہیں ہے the ٹیمپلیٹ کو صاف کریں یا ڈی این اے کو پیوریفیکیشن کٹس سے نکالیں۔
A-3 Mg2+۔ توجہ مرکوز کرنا
ایم جی2+۔ حراستی بہت زیادہ ہے - Mg کو خاص طور پر کم کریں۔2+۔ حراستی: ایم جی کو بہتر بنائیں۔2+۔ زیادہ سے زیادہ Mg کا تعین کرنے کے لیے 0.5 ملی میٹر کے وقفہ کے ساتھ 1 ملی میٹر سے 3 ملی میٹر تک رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے حراستی2+۔ ہر سانچے اور پرائمر کے لیے حراستی۔
A-4 dNTP۔
- ڈی این ٹی پی کی حراستی بہت زیادہ ہے - ڈی این ٹی پی کی حراستی کو مناسب طریقے سے کم کریں۔
A-5 اینیلنگ درجہ حرارت۔
low بہت کم اینیلنگ درجہ حرارت rop مناسب طریقے سے اینیلنگ درجہ حرارت میں اضافہ کریں۔
A-6 سائیکل
many بہت زیادہ سائیکل cycle سائیکل نمبر کو بہتر بنائیں۔
پہلا قدم مناسب پولیمریز کا انتخاب کرنا ہے۔ 3'-5 'exonuclease سرگرمی کی کمی کی وجہ سے باقاعدہ Taq پولیمریز پروف ریڈنگ نہیں کر سکتا ، اور مماثلت ٹکڑوں کی توسیع کی کارکردگی کو بہت کم کر دے گی۔ لہذا ، باقاعدہ تق پولیمریز 5 kb سے بڑے ہدف کے ٹکڑوں کو مؤثر طریقے سے بڑھا نہیں سکتا۔ توق پولیمریز کو خصوصی ترمیم یا دیگر اعلی فڈیلٹی پولیمریز کے ساتھ منتخب کیا جانا چاہیے تاکہ توسیع کی کارکردگی کو بہتر بنایا جاسکے اور لمبے ٹکڑے کو بڑھانے کی ضروریات کو پورا کیا جاسکے۔ مزید برآں ، لمبے ٹکڑوں کو بڑھانے کے لیے پرائمر ڈیزائن ، ڈینیٹریشن ٹائم ، ایکسٹینشن ٹائم ، بفر پی ایچ وغیرہ کے متعلقہ ایڈجسٹمنٹ کی بھی ضرورت ہوتی ہے۔ ٹیمپلیٹ کو پہنچنے والے نقصان کو روکنے کے لیے ، 94 ° C پر ڈینیٹریشن کا وقت 30 سیکنڈ یا اس سے کم فی سائیکل ہونا چاہیے ، اور درجہ حرارت 94 ° C تک بڑھانے کا وقت 1 منٹ سے کم ہونا چاہیے۔ مزید برآں ، توسیع کا درجہ حرارت تقریبا 68 68 ° C پر رکھنا اور 1 kb/min کی شرح کے مطابق توسیع کا وقت ڈیزائن کرنا لمبے ٹکڑوں کی موثر توسیع کو یقینی بنا سکتا ہے۔
اعلی خلوص کے ساتھ مختلف ڈی این اے پولیمریز کا استعمال کرکے پی سی آر پرورش کی غلطی کی شرح کو کم کیا جاسکتا ہے۔ اب تک پائے جانے والے تمام طاق ڈی این اے پولیمریز میں ، پی ایف یو انزائم میں سب سے کم خرابی کی شرح اور سب سے زیادہ وفاداری ہے (منسلک ٹیبل دیکھیں)۔ انزائم سلیکشن کے علاوہ ، محققین رد عمل کے حالات کو بہتر بنا کر پی سی آر اتپریورتن کی شرح کو مزید کم کرسکتے ہیں ، بشمول بفر کمپوزیشن ، تھرماسٹیبل پولیمریز کی حراستی اور پی سی آر سائیکل نمبر کو بہتر بنانا۔
مصنوعات کے زمرے۔
ہمیں کیوں منتخب کریں۔
اس کے قیام کے بعد سے ، ہماری فیکٹری اصول کی پاسداری کے ساتھ پہلی عالمی معیار کی مصنوعات تیار کر رہی ہے۔
پہلے معیار کا ہماری مصنوعات نے انڈسٹری میں بہترین ساکھ حاصل کی ہے اور نئے اور پرانے صارفین کے درمیان قیمتی اعتماد۔
- ٹیلی فون: +86 010-59822688۔
- بلڈنگ 5 ، نمبر 86 ، شوانگنگ ویسٹ روڈ ، ضلع چانگپنگ ، بیجنگ۔
- people@tiangen.com
